DNase I, RNase-Free, HC
貨號/規格：E1018-A/1,000 U
濃度：50 U/μL
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產品簡介
DNase I（無 RNase）是一(yi)種可酶(mei)切單(dan)鏈(lian)和雙鏈(lian) DNA 的核(he)酸(suan)內切酶(mei)。它水(shui)解磷(lin)酸(suan)二(er)酯鍵(jian)，產(chan)生(sheng)帶有 5'-磷(lin)酸(suan)基(ji)團(tuan)和 3'-OH 基(ji)團(tuan)的單(dan)脫氧(yang)核(he)糖(tang)核(he)苷(gan)酸(suan)和寡脫氧(yang)核(he)糖(tang)核(he)苷(gan)酸(suan)。
該酶的活性嚴格依賴于 Ca2+，由 Mg2+?或 Mn2+?離子活化。
在 Mg2+?存在時，DNase I 以統計意義上隨機的方式獨立切割 dsDNA 各鏈。Mn2+?存(cun)在(zai)時(shi)，該(gai)酶幾乎在(zai)同(tong)一(yi)(yi)位點切割兩條 DNA 鏈，產生(sheng)帶有平末端(duan)或僅一(yi)(yi)或兩個核甘酸的突出端(duan)的 DNA 片段。
產品組成
| 組分 | E1018-A |
| DNase I, RNase-Free, HC?(50 U/μL) | 20 μL |
| 10X DNase I?Buffer (Mg2+?Plus) | 1 mL |
| EDTA (50 mM) | 1 mL |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有編碼(ma)牛 DNase I 的(de)克(ke)隆基因。
單位定義
一(yi)個單位是指(zhi)在37°C下1分鐘內完全降解 1 μg質粒 DNA所需的(de)酶量。
在以下混合物中(zhong)測定酶活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 時 pH 7.5）、2.5 mM MgCl?2、0.1 mM CaCl?2、1 μg pUC19 DNA。一個 DNase I 單(dan)位(wei)相當于(yu) 0.3 Kunitz 單(dan)位(wei)。
特點
? 重組酶
? 從非動物宿主純化而來，內源性 RNase 水平(ping)較低
適用范圍
? 制備(bei)不(bu)含(han) DNA 的 RNA
? 體外轉錄后去(qu)除模板 DNA
? 在進(jin)行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制備無(wu) DNA 的 RNA
? 與 DNA 聚合(he)酶 I 配(pei)合(he)，通過缺口平移進行 DNA 標記
??采用 DNase I（無 RNase）足(zu)跡法(fa)進行(xing) DNA-蛋(dan)白相互作(zuo)用研(yan)究
? 生成隨機重疊 DNA 插入片段文庫。使用含有 Mn2+?的反應緩沖液