T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或(huo) RNA 中并(bing)列(lie)的 5'-磷酸(suan)和 3'-羥基末端(duan)(duan)之間形成磷酸(suan)二(er)酯(zhi)鍵。該酶(mei)可修復雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或(huo) DNA/RNA 雜交體中的單(dan)鏈缺口，將 DNA 片段(duan)與粘性末端(duan)(duan)或(huo)平末端(duan)(duan)連(lian)接(jie)結合，但對單(dan)鏈核酸(suan)無活性。
T4 DNA 連接酶(mei)需要 ATP 作(zuo)為輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆(long)的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化(hua)為可吸附形式所需的酶量。在以下混合(he)物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單位相當于大約 200 個粘性末端連接單位（CEU）。1個CEU是指在(zai)特定條件下(xia)（即在(zai)16°C下(xia)30分(fen)鐘(zhong)內），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連接達到50%所(suo)需的酶量。
適用范圍
? 克隆限(xian)制(zhi)性內切酶生成的 DNA 片(pian)段
??克隆 PCR 產物(wu)
? 將雙鏈寡核(he)苷酸(suan)連(lian)接(jie)子或接(jie)頭與 DNA 相連(lian)
? 定點突變
? 擴(kuo)增(zeng)片段長度多(duo)態(tai)性(xing) (AFLP)
? 連接(jie)酶介導的 RNA 檢測
? 雙螺(luo)旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的(de)缺口修復
? 線(xian)性 DNA 的自(zi)環化