T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或 RNA 中并列的(de) 5'-磷酸和 3'-羥基(ji)末端之間(jian)形成磷酸二酯(zhi)鍵。該酶可修復雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜(za)交體中的(de)單鏈缺口，將 DNA 片段與(yu)粘性末端或平(ping)末端連接結合(he)，但對(dui)單鏈核酸無活性。
T4 DNA 連接酶需(xu)要(yao) ATP 作為(wei)輔因(yin)子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因(yin) 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附形式所需的(de)酶量。在以(yi)下混合物(wu)中(zhong)測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單(dan)位(wei)相當于大約 200 個粘性末端連接單(dan)位(wei)（CEU）。1個CEU是指在(zai)特定條(tiao)件下（即在(zai)16°C下30分鐘內(nei)），將(jiang)λ（lambda）DNA的(de)HindIII片段連接達到(dao)50%所需(xu)的(de)酶(mei)量。
適用范圍
? 克隆限制性內(nei)切酶生成的 DNA 片(pian)段
??克隆 PCR 產物(wu)
? 將雙鏈寡核苷酸連(lian)接子或接頭與(yu) DNA 相連(lian)
? 定點突變
? 擴增片段長度多態性(xing) (AFLP)
? 連接酶介導的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜(za)交體中的缺口(kou)修復
? 線性(xing) DNA 的自環化(hua)