T4 DNA Ligase
貨號/規格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度：5 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或 RNA 中并列的(de) 5'-磷酸和(he) 3'-羥(qian)基末端(duan)之間形成磷酸二酯鍵。該酶可修復雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜(za)交體中的(de)單鏈缺口(kou)，將(jiang) DNA 片段與粘性(xing)末端(duan)或平末端(duan)連接結合，但對單鏈核酸無活性(xing)。
T4 DNA 連接(jie)酶需(xu)要 ATP 作(zuo)為(wei)輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
| T4 DNA Ligase?(5 Weiss U/μL) | 40 μL | 200 μL | 200 μL ×?5 |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附(fu)形式所需的酶量。在以下混合物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單(dan)位相當于大(da)約(yue) 200 個粘(zhan)性末端連接單(dan)位（CEU）。1個CEU是(shi)指(zhi)在(zai)特定(ding)條件下（即在(zai)16°C下30分鐘內），將(jiang)λ（lambda）DNA的HindIII片段連接達到50%所需的酶量。
適用范圍
? 克(ke)隆限(xian)制性內切酶生(sheng)成的(de) DNA 片(pian)段
??克隆 PCR 產物
? 將雙鏈寡核苷酸連(lian)接(jie)子或接(jie)頭(tou)與 DNA 相(xiang)連(lian)
? 定點突變
? 擴增片段長(chang)度(du)多態性 (AFLP)
? 連接(jie)酶(mei)介導的 RNA 檢(jian)測(ce)
? 雙螺(luo)旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體中的缺口修復
? 線性(xing) DNA 的自環化