Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
使用說明書
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【產品名稱】
Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
【貨號/規格】
KM004-A（24?rxns）；KM004-B（96?rxns）；試用裝（6?rxns）
【產品簡述】
本(ben)試(shi)劑盒針對 MGI?高(gao)通(tong)量(liang)測序平(ping)臺，提供了(le)一管式便捷(jie)、通(tong)用的(de)(de) DNA 文庫構建(jian)方案，將片段化、末端(duan)補平(ping)和(he)(he)末端(duan)加(jia) A 結(jie)合(he)到(dao)一個步驟，大(da)大(da)縮(suo)短(duan)了(le)建(jian)庫的(de)(de)時間(jian)、減少(shao)了(le)繁(fan)瑣(suo)步驟造成的(de)(de)誤差，片段化和(he)(he)末端(duan)修(xiu)復后(hou)(hou)的(de)(de)產物可直接(jie)進行接(jie)頭連接(jie)，不需額外純化，后(hou)(hou)續(xu)操作和(he)(he)#KM001 Fast DNA Library Prep Kit?for MGI操作相同。完(wan)整的(de)(de)文庫定(ding)(ding)量(liang)可將文庫稀釋至合(he)適濃度，用雙鏈(lian) DNA 熒光染料方法（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或(huo) qPCR 絕對定(ding)(ding)量(liang)方法。
【樣本類型】
表(biao) 1 常用(yong)DNA推薦投(tou)入量
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應用 |
樣本類型 |
推薦投入量 |
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全基因組測序 |
高質量復雜基因組 |
50ng-1μg |
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全外顯子靶向捕獲測序 |
高質量復雜基因組 |
10ng-1μg |
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全基因(yin)組靶向捕獲測序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
推薦使用 TE 或超純水(shui)溶解 DNA 樣品，如樣品中(zhong)含有 EDTA，則(ze)需磁珠純化或加(jia)入一定體(ti)積的 Neutralization Buffer 中(zhong)和。
【儲存條(tiao)件及有效期】
所有試劑均(jun)應(ying)保(bao)存于-20℃，Ligation Buffer 在低(di)溫(wen)下會有晶體析出，屬正常現象， 應(ying)平衡至室溫(wen)后使用，產品有效(xiao)期為 12 個月。
【組成成分】
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組分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120?μl |
480?μl |
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FEP Enzyme Mix |
240?μl |
2×480?μl |
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Fast DNA Ligase |
120?μl |
2×240?μl |
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Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
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Primer Mix?for MGI * |
120?μl |
480?μl |
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Neutralization Buffer |
120?μl |
480?μl |
*FEP Buffer 為片段化、末端修復的反應 buffer，FEP Enzyme Mix 為片段化、末端修復相關(guan)酶混合物。
*若有(you)多(duo)個樣(yang)本(ben)，則推薦使用#KM002 和#KM003 接頭引物(wu)組合，本(ben)試劑盒提供一套(tao)引物(wu)，引物(wu)序列如(ru)下(xia)：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備(bei)注：分選磁(ci)珠推薦(jian)使用#NC1011 GDSPure?DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。